47.實驗課上某生分別配製了胃蛋白酶（pepsin）與胰蛋白酶（trypsin）酵素溶液，但忘記標示酵素名稱。下 列何者可最快速且經濟的方法，分辨此二酵素溶液？
(A)取適量酵素溶液與白蛋白進行水解反應1小時後，測量胺基酸產物種類
(B)取適量酵素溶液與白蛋白在pH=2條件下進行水解反應後，利用雙脲試劑（Biuret reagent）進行呈色反應 和比較
(C)利用單株抗體的專一性進行抗體與酵素的免疫分析反應（ELISA）後，測量特定波長的吸光值
(D)取適量酵素溶液與白蛋白在37℃下進行水解反應後，利用比色法測量產物肽鏈（peptide）的呈色反應

這題考的是酵素的pH值專一性（pH specificity）與實驗設計的實務應用，是在考場上需要判斷「效率」與「成本」的經典題目。

正確答案是 (B) 取適量酵素溶液與白蛋白在pH=2條件下進行水解反應後，利用雙脲試劑（Biuret reagent）進行呈色反應和比較。

? 核心解析：為什麼 (B) 是最快速且經濟的方法？

要分辨胃蛋白酶與胰蛋白酶，最根本的差異在於它們的最適作用環境（Optimum pH）：

1. 特性區隔：

   • 胃蛋白酶 (Pepsin)：最適 pH 值約在 1.5 ~ 2.5 之間（強酸環境）。在強酸下具有極高的水解蛋白質活性。

   • 胰蛋白酶 (Trypsin)：最適 pH 值約在 7.5 ~ 8.5 之間（弱鹼環境）。在 pH=2 的強酸環境下，胰蛋白酶會發生不可逆的變性，幾乎喪失活性。

2. 實驗效率：

   • 在 pH=2 的環境下，只有胃蛋白酶能有效將白蛋白分解為更小的肽鏈或胺基酸。

   • 雙脲試劑 (Biuret reagent) 的功能是檢測蛋白質中的肽鍵。如果酵素有活性（Pepsin），蛋白質會被水解成短肽鏈，雙脲試劑的呈色反應會減弱或產生變化；若酵素失去活性（Trypsin），蛋白質維持原樣，呈色程度則不同。

   • 這個方法只需調整 pH 值並進行簡單的比色，相較於 ELISA（昂貴抗體）或精細的胺基酸分析（時間成本極高），這是最經濟實惠的方案。

? 選項解析：

• (A) 錯誤：測量胺基酸產物種類需要高效液相層析（HPLC）或精密儀器，極度費時且昂貴。

• (C) 錯誤：ELISA 需要購買特定的單株抗體，成本非常高，且需要長時間的前置處理，不符合「最快速、最經濟」的原則。

• (D) 錯誤：單純在 37℃ 反應沒有標註 pH 條件，在未知環境下無法體現兩者的活性差異，無法區分。

? 考前衝刺「消化酵素關鍵筆記」：

• 胃蛋白酶 (Pepsin)：胃液、強酸 (pH 1-2)、裂解蛋白質。

• 胰蛋白酶 (Trypsin)：胰液、弱鹼 (pH 7-8)、裂解蛋白質。

• 實驗設計邏輯：要分辨酵素，就給它「只有一方能活」的條件（例如強酸環境）。