59. 在利用 CRISPR/Cas9 系統進行人類細胞基因編輯時,研究者常需評估脫靶效應(off-target effect)。已知 sgRNA 與標的 DNA 的鹼基配對是專一性來源,但仍可能出現部分錯配而造成非預期切割。若研究者欲設計能最大限度減少脫靶效應的 sgRNA,下列策略何者最為合理?
(A) 選擇目標序列附近不含 PAM 序列,以避免 Cas9 結合
(B) 將 sgRNA 設計於基因組高度重複序列區域,增加結合機率
(C) 避免 sgRNA 在 3' 端出現多個連續 G,以降低非專一性結合
(D) 採用高保真(high-fidelity)Cas9 蛋白變體並同時優化 sgRNA 配對區
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