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學習重點 掌握波段：紫外光（UV）偵測範圍約 200～400 nm；可見光區約 400～800 nm，兩者不要對調。 理解 UV 偵測原理：UV 偵測器依分析物對所選波長的吸收產生訊號。分析物在該波長要有足夠吸收，才容易被偵測。 認識 DAD／PDA：二極體陣列偵測器能在儀器涵蓋的波長範圍內，同時取得多波長吸收資料與完整 UV 光譜，提供滯留時間以外的辨識資訊。 掌握峰純度判讀：滯留時間相同而無法區分的成分，可以比較光譜差異來判斷是否共沖提，這是 DAD 的典型用途。 熟記 AUFS：全名為 absorbance units full scale（吸光度單位全刻度），指偵測器輸出滿刻度所對應的吸光度範圍。 核心觀念 一、紫外光與可見光波段：先看數字，再辨認區域 UV 為 ultraviolet，即紫外光；Vis 為 visible，即可見光。藥物分析常用的 UV 吸收偵測，是測量分析物對特定波長光線的吸收程度，再把訊號隨時間的變化畫成層析圖。紫外光區約為 200～400 nm，可見光區約為 400～800 nm。 波長範圍所屬區域作答關鍵 小於 200 nm真空紫外區，空氣與溶劑吸收干擾大，不是一般 UV 偵測器的工作範圍不要因為波長較短就選它 約 200～400 nm紫外光區問 UV 偵測器的偵測範圍，選這一段 約 400～800 nm可見光區常被拿來和紫外光區互換的錯誤選項 800～1200 nm近紅外區不是紫外光區 這些數字是常用的近似範圍，各儀器的實際規格會略有差異。考題問一般 UV 偵測器的偵測範圍時，就用 200～400 nm 判斷。 UV 偵測器對各物質的反應並不相同。分析物在所選波長的吸收越明顯，通常越容易偵測。若某物質幾乎沒有 UV 吸收，調整輸出刻度也無法讓它變得容易偵測。 二、DAD／PDA：用光譜資訊分辨共沖提波峰 DAD 是 diode array detector，二極體陣列偵測器；PDA 是 photodiode array detector，光二極體陣列偵測器。在液相層析的語境中，兩者都是用陣列元件同時取得多波長吸收資料的偵測器，本質上屬於 UV‑Vis 吸光偵測器的進階型。 一般單波長 UV 層析圖只記錄「時間與吸光訊號」的關係。DAD／PDA 多了波長這個維度，可取得時間、波長與吸光度三維資料，並擷取任一時間點的 UV 吸收光譜。這裡的「全波長光譜」指儀器可涵蓋範圍內的光譜，並非所有電磁波波長。 主成分（例如麻黃素）與不純物的滯留時間相同時，只看滯留時間無法區分兩者。只要兩者的 UV 光譜特徵不同，DAD 就能用光譜差異加以分辨。因此，題目出現「滯留時間相同、共沖提、比較 UV 光譜、峰純度」等線索時，答案就是 DAD／PDA。 峰純度分析的做法，是比較同一波峰前緣、峰頂與後緣的光譜是否一致： 光譜隨位置改變：表示可能有不同成分共沖提。 光譜前後一致：只能說明峰的光譜均一，不能證明絕對純淨。光譜極相似、含量過低或缺乏 UV 吸收的不純物，仍可能偵測不出來。 偵測器主要偵測依據能否以 UV 光譜分辨同滯留時間成分 DAD／PDA多波長吸收與 UV 光譜可以，比較光譜差異即可判斷峰純度 ELSD（蒸發光散射偵測器）移動相蒸發後，分析物粒子的光散射不行，只產生單一訊號，沒有光譜資訊 RI detector（折射率偵測器）溶液折射率的改變不行，屬通用型單一訊號，無法區分共沖提物 Electrochemical detector（電化學偵測器）分析物的氧化還原反應電流不行，不提供 UV 光譜 三、AUFS：滿刻度對應多少吸光度 AUFS＝absorbance units full scale，中文為吸光度單位全刻度。AU 是 absorbance units（吸光度單位），FS 是 full scale（滿刻度）。它表示偵測器輸出達到滿刻度時所對應的吸光度範圍，是 UV 吸光偵測器設定靈敏度的術語，常見於層析法結果報告與儀器條件中。 在相同輸出或記錄條件下，AUFS 設得越小，滿刻度代表的吸光度就越小，同一個吸光度訊號占的刻度比例就越大。舉例來說，0.01 AU 的訊號在 0.1 AUFS 下占滿刻度的十分之一，在 1.0 AUFS 下只占百分之一。因此，AUFS 設小，小訊號在圖上會顯得較大，但大訊號也較容易超出滿刻度（峰頂被截平）。 要區分「圖上看起來較靈敏」與「實際偵測能力提高」。調小 AUFS 不會增加分析物本身的吸收，也不一定能改善訊雜比或偵測極限。 常考陷阱 把 400～800 nm 當成紫外光：那是可見光區，UV 是約 200～400 nm。 選小於 200 nm 或 800～1200 nm：前者是真空紫外區，後者是近紅外區，都不是一般紫外光偵測器的範圍。 認為滯留時間相同就一定是同一物質：不同成分可能共沖提，需要光譜資訊輔助辨識。 以為 ELSD、RI、電化學偵測器也能分辨共沖提成分：它們只輸出單一訊號，沒有 UV 光譜可以比對。能比對光譜的只有 DAD／PDA。 以為 DAD 能改善層析分離：DAD 只提供偵測與光譜資訊，不會讓兩峰分開。要改善分離，須調整移動相、管柱等層析條件。 以為峰純度通過就保證沒有不純物：光譜相似或訊號太弱的共沖提成分可能辨識不出來。 誤解 AUFS 的英文：關鍵字是 absorbance、units、full scale。all units for scaling、a useful scale、a unit for signal 都是望文生義的錯誤選項。 以為 AUFS 越大，圖上訊號越大：同樣的訊號，滿刻度範圍越大，所占比例反而越小。 記憶口訣 「紫二到四，可四到八」：以百奈米為單位，紫外光約 200～400 nm，可見光約 400～800 nm。 「同時出峰看光譜，陣列比對查峰純」：滯留時間相同時，選 DAD／PDA。 「AU 是吸光，FS 是全幅；刻度設小，訊號占大」：記住 AUFS 的全名，以及刻度大小與訊號比例的關係。