學習重點 離心前與分離後分開判斷:一般血液離心前以室溫約 25℃放置,避免溶血;不能因超過 2 小時未離心,就一律改放 4℃。 掌握延遲分離的方向:葡萄糖下降,乳酸、血氨與鉀上升;密閉全血久放,pH 下降。 區分密閉久放與接觸空氣:前者以細胞代謝影響為主,後者可使 CO₂ 下降、O₂ 上升及 pH 上升。 冰浴、冷藏、避光各有目的:需要冰浴運送,不代表適合長期冷藏;避光也不能取代溫度控制。 特殊項目記牢:PTHrP 的蛋白酶抑制劑,以及膽紅素、coproporphyrin、維生素 A 與 B₂ 的避光要求。 核心觀念 一、一般檢體的離心前處理與附加檢測 採血後,血球仍持續代謝,應在規定時間內完成分離。一般血液檢體離心前,以室溫約 25℃放置最能避免溶血;血清檢體須先充分凝固,再依規定離心。不可任意將未分離全血冷凍,也不能將「無法在 2 小時內離心就放 4℃」當成通則。特殊檢驗另有處理要求時,須依該項目的採檢規範。 分離後的血清或血漿,才依分析物的穩定性決定冷藏、冷凍及保存期限。全血、血清與血漿的保存條件不能互相套用。運送時也應避免劇烈震盪、溶血及不必要的開蓋。 附加檢測(add-on request)可使用仍在有效保存期限內的檢體,但須同時確認檢體種類、添加物、剩餘量、保存條件及待測物穩定性均符合要求;未過期只是條件之一。 二、冰水浴運送與低溫保存 冰浴運送主要用於減緩採檢後的代謝或分解,並須搭配迅速送檢與處理。以下為本單元題目採用的判斷;實際操作仍須遵循檢驗室對採血管、容器、時間及溫度的要求。 項目本單元運送判準辨別重點 乳酸、丙酮酸、氨須冰水浴運送並迅速處理。延遲可使代謝持續,尤其乳酸與氨容易偽性升高。 動脈血液氣體採密閉、避免氣泡,迅速送檢;本單元歸入冰浴運送。不能只記降溫,還要避免接觸空氣。 胃泌素、腎素本單元歸入須冰浴運送的項目。短時間運送與後續冷藏儲存須分開判斷。 ACTH依本單元答案,不列為必須冰水浴運送者。此判準不代表可任意室溫久放,實務須依檢驗室流程。 LDH、ALP、膽固醇、酸磷酸酶本單元不以冰水浴運送為必要條件。勿因名稱含「酶」,就判定必須冰浴。 冰浴不等於冷凍。未分離全血冷凍會破壞血球,可能造成溶血及細胞內物質釋出,不能用來取代正常分離流程。 三、延遲離心的代謝變化 檢驗項目典型變化原因與作答關鍵 葡萄糖下降血球持續糖解,室溫下約每小時下降 5~10 mg/dL。 乳酸上升糖解作用持續產生乳酸。 血氨上升胺基酸代謝及相關分解反應持續產生氨。 鉀上升久放後細胞內鉀外漏,溶血亦可使鉀升高。 pH密閉久放時下降細胞代謝與酸性產物累積。 尿素一般短期延遲下相對穩定不是本單元延遲離心的典型受影響項目。 全血久放後再分離血清,最直接的判斷是葡萄糖降低;不能改選鈉升高、膽固醇降低或磷降低。延遲分離確實可能影響電解質,但不同離子的變化不能一概而論。 氟化鈉(NaF)可抑制糖解作用。本單元採用「適當保存時,可使血糖約三天維持穩定」的判準;但其抑制作用並非採血瞬間即完全發揮,不能據此認為添加 NaF 後就可忽略及時處理。 四、密閉久放與接觸空氣的差別 密閉全血久放:細胞持續代謝,使葡萄糖下降、乳酸上升及 pH 下降;不能說糖解作用會使 PCO₂ 下降。持續細胞代謝通常可使 PCO₂ 上升。 開蓋或操作時接觸空氣:氣體與外界重新平衡,依本單元的一般情境,可出現 CO₂ 下降、O₂ 上升及 pH 上升。作答時先辨認「密閉久放」或「接觸空氣」,就能避免把相反的 pH 變化混用。 五、冷藏造成的活性變化 依本單元答案,LDH 活性與腎素活性屬於放冰箱後可能偽性下降的項目;磷與 ALP 活性不是此處所考的典型答案。LDH 具有冷不穩定性,不能認為溫度愈低就一定保存愈好。 腎素結果與測定方法、溫度及保存時間有關,因此本單元的冷藏判準不可擴大成所有腎素檢驗的通則。同樣地,「-20℃冷凍可使全血中的 LD 穩定數月」是錯誤敘述;它同時忽略了全血冷凍造成血球破壞及 LDH 本身的穩定性問題。 六、避光項目與蛋白酶抑制劑 項目保存重點 膽紅素須避光;光照會使其分解,造成濃度偽性降低。 Coproporphyrin(糞卟啉)採檢後應立即避光送檢。 維生素 A、維生素 B₂本單元列為須避光項目。 維生素 C在本單元的維生素與膽紅素比較中,選為不需要避光者;此答案不可延伸為所有實務檢驗均不須避光。 PTHrP須注意蛋白酶分解,依規範使用蛋白酶抑制劑維持穩定性。 副甲狀腺激素相關蛋白(PTHrP)是本單元蛋白酶抑制劑的辨識重點。可用抑制劑例子包括 aprotinin、leupeptin 等,目的在減少採血後蛋白酶對待測物的分解。與降鈣素、骨鈣素及骨型鹼性磷酸酶比較時,應辨認 PTHrP,不能只憑「屬於蛋白質或胜肽」就認定保存方式相同。 常考陷阱 「超過 2 小時未離心,一律放 4℃」:錯。一般離心前血液以室溫保存,特殊項目另依規範處理。 「糖解使葡萄糖、乳酸與 PCO₂ 都下降」:錯。葡萄糖下降,乳酸上升;不能把 PCO₂ 下降歸因於糖解。 「全血久放一定使 pH 上升」:錯。密閉久放偏向下降;接觸空氣、CO₂ 逸散才是本單元 pH 上升的情境。 「延遲離心會明顯改變尿素」:不是本單元的典型變化,應優先辨認血糖與電解質受影響。 「所有酵素都要冰浴,冷凍都能保存數月」:錯。LDH 不須冰浴送檢,且須注意冷不穩定性。 「需要冰浴就適合長期冷藏」:錯。運送與儲存是不同階段,腎素尤其須分開記憶。 「避光就是冷藏,冷藏就是防止蛋白分解」:錯。光分解、細胞代謝與蛋白酶分解須分別處理。 記憶口訣 「全血久放糖下降,乳酸氨鉀往上揚;密閉酸、開蓋鹼,先看情境再判斷。」 「乳、丙、氨要冰;膽、卟、A、B₂ 要遮光;PTHrP 防酶傷。」其中「丙」指丙酮酸,「卟」指 coproporphyrin。