學習重點 液態活檢以體液為檢體:可偵測循環腫瘤 DNA(ctDNA)、循環腫瘤細胞(CTC)及腫瘤細胞外泌體,不能直接等同於腫瘤組織基因體檢測。 ctDNA 是腫瘤細胞釋出、進入循環的細胞外 DNA:可從血液中測得,通常由血漿分離取得,不是只存在於血液有核細胞內的 DNA。 CTC 是進入血液循環的完整腫瘤細胞:與 ctDNA 都屬於液態活檢的檢測標的。 掌握兩者的比較方向:CTC 檢測通常需要較多採血量;ctDNA 較容易反映腫瘤異質性;兩者的動態變化都可協助監測腫瘤進程。 核心觀念 一、液態活檢:從體液取得腫瘤相關資訊 液態活檢(liquid biopsy)是從血液等體液中取得腫瘤相關生物標記,再進行分子或細胞分析。判斷是否屬於液態活檢,重點在於檢體來自體液,而不是檢測材料一定要是游離分子;完整的循環腫瘤細胞也可以是液態活檢的分析對象。 ctDNA:腫瘤細胞釋出、存在於循環中的細胞外 DNA 片段。 CTC:由腫瘤病灶脫落後進入血液循環的完整腫瘤細胞。 腫瘤細胞外泌體:腫瘤細胞釋出的細胞外囊泡,可攜帶核酸及蛋白質等分子,提供腫瘤相關資訊。 直接分析腫瘤組織細胞基因體,屬於組織檢體的分析範疇。液態活檢雖然可以透過 ctDNA 或 CTC 得知腫瘤的部分基因變異,卻不是直接取得原發灶或轉移灶的腫瘤組織進行分析。因此,必須區分「從體液推知腫瘤基因資訊」與「直接檢測腫瘤組織基因體」。 二、ctDNA:腫瘤釋出的細胞外 DNA 循環腫瘤 DNA(circulating tumor DNA, ctDNA)是腫瘤來源、進入血液循環的細胞外 DNA。腫瘤細胞可在死亡或其他釋出過程中,使 DNA 進入循環;所以其來源定義的關鍵是「由腫瘤細胞釋出」。 血液中的游離 DNA 稱為 cell-free DNA(cfDNA),來源包括正常細胞與腫瘤細胞。ctDNA 是 cfDNA 中源自腫瘤的部分,不能把所有 cfDNA 都視為 ctDNA。檢測通常先分離血漿,再萃取其中的 cfDNA,分析腫瘤相關變異。 ctDNA 的「細胞外」性質,表示它不必存在於完整有核細胞內。因此,「不能在血液循環中測得」及「只能從血液有核細胞測得」都不正確。直接從腫瘤組織細胞抽取的 DNA,則是組織來源 DNA,不能僅因其來自腫瘤就稱為 ctDNA。 三、CTC:循環中的完整腫瘤細胞 循環腫瘤細胞(circulating tumor cell, CTC)是由原發腫瘤或轉移病灶脫落、進入血液循環的完整腫瘤細胞。它與 ctDNA 的根本差別在於:CTC 是細胞,ctDNA 是細胞外 DNA 片段。 CTC 可供細胞計數、形態觀察、蛋白表現或基因分析。由於 CTC 在血液中通常相當稀少,需要經過富集或捕獲程序;相較於 ctDNA 檢測,通常需要較多採血量。實際需求仍受檢測方法與平台影響,不宜背成固定體積或絕對規則。 四、ctDNA 與 CTC 的比較 比較項目ctDNACTC 基本性質腫瘤來源的細胞外 DNA 片段進入循環的完整腫瘤細胞 主要分析材料通常由血漿取得的 cfDNA 中之腫瘤來源片段從血液中富集、捕獲的腫瘤細胞 是否屬於液態活檢是是 相對採血需求通常較少通常較多,因細胞稀少 腫瘤異質性評估較容易彙整不同腫瘤細胞或病灶釋出的 DNA 資訊受捕獲細胞數量與代表性影響 腫瘤進程監測可追蹤 ctDNA 濃度或相關變異的變化可追蹤 CTC 數量的變化 五、動態監測與腫瘤異質性 腫瘤異質性是指同一腫瘤內不同細胞族群,或不同腫瘤病灶之間,具有不同的分子特徵。ctDNA 可包含不同腫瘤細胞或病灶釋出的 DNA,因此相較於有限數量的 CTC,通常較容易提供較廣泛的腫瘤異質性資訊;但不代表每次檢測都能完整呈現所有腫瘤族群。 CTC 數量與 ctDNA 濃度的變化,都可協助監測腫瘤進程。連續採樣能觀察指標隨時間的改變,作為評估疾病進展及治療反應的參考。實際判讀須結合影像與其他臨床資料,不能把單次數值直接等同於病情結論。 常考陷阱 「液態活檢可直接檢測腫瘤組織細胞基因體」:錯在混淆檢體來源。液態活檢取自體液;直接分析腫瘤組織須取得組織檢體。能得知腫瘤基因資訊,不代表直接檢測腫瘤組織。 「CTC 不屬於液態活檢」:錯。液態活檢不限定分析游離 DNA,也包括循環中的完整腫瘤細胞及腫瘤細胞外泌體。 「ctDNA 無法在血液循環中測得」:錯。ctDNA 正是進入循環的腫瘤來源細胞外 DNA,可從血液檢體偵測。 「ctDNA 只能從血液有核細胞測得」:錯。典型檢測材料為血漿中的細胞外 DNA;血球細胞內 DNA 不是 ctDNA 的定義。 「ctDNA 是由腫瘤細胞抽出的 DNA」:不是正確的來源定義。應抓住「腫瘤細胞釋出並進入循環」;實驗室可從血漿萃取 ctDNA,但這與直接從腫瘤細胞抽取 DNA 不同。 「CTC 採血量較少,且較容易評估整體異質性」:比較方向相反。CTC 通常需較多採血量;ctDNA 通常較容易彙整不同腫瘤來源的分子資訊。 「只有 ctDNA 能監測腫瘤進程」:錯。CTC 數量與 ctDNA 濃度的動態變化都具有監測價值。 記憶口訣 「液檢三寶:DNA、細胞、外泌體;組織直接驗,另取組織體。」 「DNA 是釋出,CTC 是細胞;CTC 血量較多,DNA 異質較好找;兩者追變化,進程都能瞧。」