阿摩線上測驗
登入
阿摩線上測驗
登入
學習重點 熟記兩個反應：ALT 將丙胺酸轉為丙酮酸；AST 將天門冬胺酸轉為草醯乙酸，兩者都以 α-酮戊二酸接受胺基，生成 L-麩胺酸。 辨認輔酶：PLP（P-5′-P）是維生素 B6 衍生的輔酶，可協助轉胺反應，完成催化循環後會再生，不被淨消耗。 掌握組織分布：ALT 以肝臟活性最高，對肝臟的專一性較 AST 高；AST 廣泛存在於肝臟、心肌、骨骼肌與紅血球等。 理解檢測方向：AST、ALT 的常用動力學測定以連鎖反應消耗 NADH，在 340 nm 觀察吸光度下降。 連結臨床與檢體：溶血可能使 AST 偽性升高；一般血清 ALT 半衰期較 AST 長，心肌梗塞也可能使 AST 明顯升高。 核心觀念 一、轉胺反應：胺基移轉，碳骨架留下 轉胺酶催化胺基酸與 α-酮酸之間的胺基轉移。以本單元的正向反應表示： 胺基酸＋α-酮戊二酸 ⇌ 對應的 α-酮酸＋L-麩胺酸 胺基酸交出胺基後，留下對應的 α-酮酸；α-酮戊二酸接受胺基後，成為 L-麩胺酸。這是胺基的轉移，並非直接釋出游離氨。 α-ketoglutarate、2-oxoglutarate 與 α-酮戊二酸是同一物質。題目可能交替使用不同名稱，必須辨認為相同受質。Glutamate 則為麩胺酸或麩胺酸鹽。 比較項目ALTAST 中文名稱丙胺酸轉胺酶天門冬胺酸轉胺酶 提供胺基的胺基酸L-alanine，L-丙胺酸L-aspartate，L-天門冬胺酸 共同接受胺基的受質α-酮戊二酸α-酮戊二酸 胺基酸留下的碳骨架Pyruvate，丙酮酸Oxaloacetate，草醯乙酸 共同生成的胺基酸L-glutamate，L-麩胺酸L-glutamate，L-麩胺酸 ALT：L-alanine＋2-oxoglutarate ⇌ pyruvate＋L-glutamate。因此，看到「丙胺酸轉變成什麼」時，要想到丙酮酸；若問完整正向產物，則必須同時包含丙酮酸與 L-麩胺酸。 AST：L-aspartate＋2-oxoglutarate ⇌ oxaloacetate＋L-glutamate。草醯乙酸才是直接產物，蘋果酸與乳酸都不是 AST 轉胺反應的直接產物。 這些反應具有可逆性，因此「共同受質是 α-酮戊二酸、共同產物是 L-麩胺酸」是依上述正向反應而言。反向反應中，L-麩胺酸可提供胺基給相應的 α-酮酸。 二、PLP 是輔酶，不是酵素蛋白 磷酸吡哆醛（pyridoxal 5′-phosphate，PLP 或 P-5′-P）是維生素 B6 的活性輔酶形式。它在轉胺反應中協助胺基轉移，並穩定反應中間體；不宜將其作用簡化為氧化還原反應中的電子傳遞。 PLP 在催化過程中會暫時轉變為其他化學形式，之後再生。因此，參與反應不等於被淨消耗，不能因其可提高測得活性，就判斷它會持續耗盡。 Apoenzyme：尚未結合所需輔酶的酵素蛋白。 Coenzyme：輔酶，本單元即為 PLP。 Holoenzyme：酵素蛋白與所需輔酶結合後的完整酵素。 檢測試劑可添加 PLP，以活化原先未充分結合輔酶的轉胺酶，提高測得活性；是否添加依方法而定。加入的是輔酶 PLP，不是把 PLP 當作 apoenzyme。 三、組織分布、同功酶與臨床意義 比較項目ALTAST 組織分布重點以肝臟活性最高，腎臟等組織亦有分布廣泛分布於肝臟、心肌、骨骼肌、腎臟及紅血球等 本單元組織活性比較肝臟中 ALT 活性大於 AST心肌中 AST 活性大於 ALT 肝臟專一性相對較高相對較低 一般血清半衰期較長較短 細胞內型態有細胞質型與粒線體型，不能寫成細胞核型有細胞質型與粒線體型 細胞受損時，胞內轉胺酶釋放至血液，使血清酵素活性上升。ALT 對肝臟較具專一性，但並非僅存在於肝臟；AST 升高則也可能來自心肌或骨骼肌損傷。 心肌梗塞患者可出現 AST 明顯升高，這與心肌含有較高 AST 活性有關。不能因 AST 常被列入肝臟相關檢驗，就把所有 AST 升高都歸因於肝病。 一般而言，血清 ALT 半衰期比 AST 長，因此 ALT 升高後可能維持較久。作答重點是兩者的長短關係，不必以不確定的時數判斷。 溶血檢體不適合 AST 檢測。紅血球破裂會釋出胞內 AST，使測得活性偽性升高；此時數值未必反映患者體內組織真正受損的程度。 四、動力學檢測：看 NADH 減少的速度 常用測定法先讓轉胺酶產生 α-酮酸，再以另一個酵素進行連鎖反應，將產物的生成量轉換成可監測的 NADH 消耗量。 ALT 連鎖反應：丙胺酸＋α-酮戊二酸 → 丙酮酸＋L-麩胺酸丙酮酸＋NADH＋H+ → 乳酸＋NAD+第二步由乳酸去氫酶（LDH）催化。 AST 連鎖反應：天門冬胺酸＋α-酮戊二酸 → 草醯乙酸＋L-麩胺酸草醯乙酸＋NADH＋H+ → 蘋果酸＋NAD+第二步由蘋果酸去氫酶（MDH）催化。 NADH 在 340 nm 有明顯吸收，連鎖反應將它氧化為 NAD+，因此NADH 減少，340 nm 吸光度下降。在適當測定條件下，下降速率越快，代表檢體中的轉胺酶活性越高。直接消耗 NADH 的是連鎖指示反應，並非轉胺反應本身。 常考陷阱 「ALT 生成草醯乙酸」：把兩種酵素配反；ALT 配丙酮酸，AST 配草醯乙酸。 「共同受質是丙酮酸或蘋果酸」：正向共同受質為 α-酮戊二酸；蘋果酸僅出現在 AST 檢測的後續連鎖反應。 「將胺基轉接到 L-glutamate」：正向反應是 α-酮戊二酸接受胺基後生成 L-glutamate，應辨明接受者與產物。 「ALT 主要存在於心臟及骨骼肌」：ALT 的分布重點是肝臟；心肌與骨骼肌是 AST 的重要來源。 「ALT 有細胞質型與細胞核型」：細胞核型的配對錯誤，應辨認細胞質與粒線體的定位。 「PLP 是 apoenzyme，而且會被消耗」：PLP 是輔酶，完成催化循環後再生；apoenzyme 是酵素蛋白部分。 「340 nm 測 NADH 增加」：常用連鎖法消耗 NADH，測得的是吸光度下降速率。 「ALP、GGT 也能催化上述轉胺反應」：ALP 是鹼性磷酸酶，GGT 是 γ-麩胺醯轉移酶，均不能取代 ALT 或 AST。 記憶口訣 「ALT 丙胺變丙酮，AST 門冬變草醯；酮戊收胺成麩胺。」 「PLP 是輔酶，循環用不耗；NADH 往下降，三四零吸光少。」