學習重點 掌握轉錄作用(transcription):以DNA為模板,由RNA聚合酶催化合成RNA。 能依「模板是什麼、產物是什麼」辨認中心法則中的複製、轉錄與轉譯。 記住轉錄的主要酵素為RNA聚合酶(RNA polymerase),並與DNA聚合酶、蛋白質激酶及限制性內切酶區分。 理解DNA模板股、編碼股與RNA產物之間的序列關係,以及RNA鏈的合成方向。 核心觀念 一、中心法則與資訊傳遞 中心法則描述遺傳資訊在不同分子間的傳遞,主要包括: 作用模板或資訊來源主要產物辨識關鍵 複製replicationDNADNADNA → DNA,產生遺傳物質的副本 轉錄transcriptionDNARNADNA → RNA,將DNA上的遺傳資訊轉成RNA 轉譯translationmRNA多胜肽鏈核糖體讀取mRNA密碼子,依序連接胺基酸 轉染transfection外源核酸導入細胞的外源核酸實驗操作,不是DNA轉成RNA的過程 判讀中心法則示意圖時,先確認起始分子與產物,不要只憑箭頭方向判斷。若圖中顯示DNA局部解開,並以DNA的一股為模板形成RNA鏈,就是轉錄作用。若顯示核糖體、tRNA攜帶胺基酸以及多胜肽鏈延長,則是轉譯作用。 二、轉錄作用的定義 轉錄是以DNA為模板,依鹼基互補配對原則合成RNA的過程。RNA聚合酶使用核糖核苷三磷酸作為原料,將核苷酸連接成RNA鏈。RNA的鹼基包括A、U、G、C,其中以尿嘧啶(U)取代DNA中的胸腺嘧啶(T)。 轉錄可概分為三個階段: 起始:轉錄機制辨識啟動子,使DNA局部解開並建立轉錄起始位置。 延長:RNA聚合酶沿DNA模板移動,依互補配對原則持續加入核苷酸。 終止:到達終止訊號或發生轉錄提前終止時,RNA產物被釋出,轉錄結束。 DNA只是提供序列資訊的模板,不會在轉錄後被整條轉變成RNA,也不會因一次轉錄而被消耗。轉錄產物也不限於mRNA,尚包括rRNA、tRNA等;只有mRNA會作為模板,依據密碼子資訊合成多胜肽鏈。 三、轉錄所需的催化酵素:RNA聚合酶 以DNA為模板合成RNA時,主要催化酵素是RNA聚合酶(RNA polymerase),更完整可稱為DNA依賴型RNA聚合酶。名稱中的「RNA」是指此酵素合成的產物,因此看到「DNA → RNA」,應直接聯想到RNA聚合酶。 酵素主要功能判斷關鍵 RNA聚合酶RNA polymerase催化RNA鏈合成DNA → RNA時的正確答案 DNA聚合酶DNA polymerase催化DNA鏈合成主要參與DNA複製 蛋白質激酶protein kinase催化蛋白質磷酸化與合成RNA鏈無關 限制性內切酶restriction endonuclease辨識特定DNA序列並切割DNA負責切割DNA,不是聚合RNA RNA聚合酶能從頭起始RNA合成,不需要預先存在的引子;一般參與DNA複製的DNA聚合酶則需要引子提供可延長的3′端。這是兩者常見的比較重點。 四、模板股、編碼股與RNA序列 進行轉錄時,RNA聚合酶使用DNA雙股中的一股作為模板股。RNA與模板股的序列互補且方向相反,配對關係如下: DNA模板股RNA產物 AU TA GC CG DNA的另一半稱為編碼股。若將編碼股、模板股與RNA都改以5′→3′方向書寫,初始RNA序列與編碼股相同,但RNA使用U取代T。例如: 編碼股:5′-ATGC-3′模板股:3′-TACG-5′RNA:5′-AUGC-3′ 同一個轉錄單位使用其中一股DNA作為模板,不代表整條染色體永遠只使用同一股;不同基因可能使用不同DNA股作為模板。 五、讀取模板與合成RNA的方向 RNA聚合酶沿DNA模板股的3′→5′方向讀取,RNA則以5′→3′方向合成。新核苷酸接在RNA鏈的3′端,因此RNA鏈的延長方向是5′→3′,不能寫成3′→5′。 可將DNA比作被「由左向右閱讀」的模板,而RNA產物由左向右延長;這也能協助判斷題目示意圖中RNA的5′端與3′端。 常考陷阱 誤認為「以DNA為模板,就使用DNA聚合酶」:判斷酵素時要同時看模板與產物。合成RNA選RNA聚合酶;合成DNA才考慮DNA聚合酶。 把DNA → RNA稱為複製或轉譯:DNA → DNA是複製;DNA → RNA是轉錄;mRNA → 多胜肽鏈才是轉譯。 把轉染當成轉錄:轉染是將外源核酸導入細胞的實驗操作,不是遺傳資訊由DNA傳向RNA的作用。 認為RNA與模板股序列相同:RNA與模板股是互補且反向;RNA與編碼股比較時才是序列相同,但以U取代T。 認為RNA以3′→5′方向合成:模板讀取方向為3′→5′,RNA合成方向為5′→3′,兩者不可混淆。 認為轉錄也需要引子:RNA聚合酶可從頭起始,不需要預先存在的引子。 誤選蛋白質激酶或限制性內切酶:蛋白質激酶負責磷酸化,限制性內切酶負責切割DNA,均非催化RNA鏈合成的酵素。 記憶口訣 「複製留DNA,轉錄成RNA,轉譯接胺基酸。」先看產物,再判斷作用。 「讀模三到五,合成五到三;DNA做模板,RNA聚合酶來。」一次記住方向關係與催化酵素。