17.有關流式細胞儀的敘述,下列何者錯誤?
(A)染單核球細胞須注意Fc receptor問題
(B)可以做嗜中性白血球的功能性分析
(C)細胞存活率檢測需要酒精固定再染色
(D)前方散射光可以反應出細胞大小
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統計: A(36), B(95), C(406), D(27), E(0) #3489565
統計: A(36), B(95), C(406), D(27), E(0) #3489565
詳解 (共 2 筆)
#7416753
(C) 流式細胞儀在檢測細胞存活率(Viability)時,最常使用 PI(Propidium iodide) 或 7-AAD 等核酸染劑。
關鍵邏輯:這些染劑無法穿透完整的活細胞膜,只能進入「細胞膜受損的死細胞」內部與 DNA 結合並發出螢光。
如果在檢測存活率前使用酒精固定細胞,酒精會直接把所有活細胞的細胞膜全部打洞、破壞,導致所有細胞都被染上 PI,這樣就完全分不出誰活誰死了。因此,檢測細胞存活率必須使用未固定(Live/Unfixed)的細胞。
(A) 染單核球細胞須注意 Fc receptor 問題 → 正確。
單核球與巨噬細胞表面表達大量的 FcγR,會非特異性地抓取抗體的 Fc 段造成偽陽性。實驗時必須先加入 Fc block(阻斷劑) 預防。
(B) 可以做嗜中性白血球的功能性分析 → 正確。
例如利用流式細胞儀搭配螢光染劑(如 DHR 123),可以檢測嗜中性白血球的呼吸爆發(Respiratory burst)吞噬與殺菌功能。
(D) 前方散射光可以反應出細胞大小 → 正確(國考基本功)。
前方散射光(FSC, Forward Scatter) → 細胞的大小(Size)。
側方散射光(SSC, Side Scatter) → 顆粒度(Granularity)。
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